Я понимаю, что это на три года позже, но вот самое простое решение, без зависимости от jQuery или CSS 3, как в предыдущих решениях. На изображение ссылается свойство «NoExpandImageUrl», которое можно просто заменить на spacer.gif, меньший, чем начало строки.
<asp:TreeView ID="TreeView1" runat="server"
DataSourceID="ds1"
CssClass="LeftMenu"
CollapseImageUrl="/images/leftNavBullet0.gif"
ExpandImageUrl="/images/leftNavBullet.gif"
NoExpandImageUrl="/images/spacer.gif"
>
И это все!