У вас есть ярлык с изображением:
imageLabel = Label(root,image=image1)
imageLabel.pack()
Затем вам нужно привязать функцию для мыши, оставляя ее для изменения изображения:
def image_two(event):
imageLabel["image"] = image2
def image_one(event):
imageLabel["image"] = image1
imageLabel.bind("<Enter>", image_two)
imageLabel.bind("<Leave>", image_one)
Я протестировал это на Windows 10 Python 3.6.5, и он работает, пожалуйста, прокомментируйте, если у вас есть какие-либо вопросы.