Согласно вашему описанию, я предлагаю вам еще раз проверить свою папку, чтобы убедиться, что у вашего удостоверения пула приложений есть разрешение на доступ к этой папке.
Подробности, вы можете обратиться к следующим шагам:
1.Нажмите правой кнопкой мыши папку, в которой вы разместили приложение, и выберите свойство.
2. Выберите вкладку Безопасность
3. Нажмите кнопку Изменить, а затем кнопку Добавить
4.Нажмите кнопку Locations и убедитесь, что вы выбрали свой компьютер.
5.Введите IIS AppPool\ (eg: IIS AppPool\smartcrypt)
в поле Введите имена объектов для выбора:.
6.Нажмитенажмите кнопку «Проверить имена» и нажмите кнопку «ОК».
7.Проверьте «Изменить» в столбце «Разрешить», нажмите кнопку «ОК» и ОК.