Предполагая следующую структуру каталогов ...
.
└── Source
├── TestImage
│ └── 1.png
└── main.py
... и вы запускаете скрипт с python main.py
.
Вы должны иметь возможность использовать:
cv2.imread("./TestImage/1.png")
Если вы используете Windows, вы можете использовать \
вместо /
.