Если вы используете python 3.8, вы можете использовать оператор :=
для удобного написания этого:
while not (username := input("username: "))[0].isalpha():
print('username must start with a letter')
# do stuff
В противном случае ваш выбор будет:
(a) Повторите строку кода
username = input("username: ")
while not username[0].isalpha():
print('username must start with a letter')
username = input("username: ")
# do stuff
или (b) Используйте бесконечный вид с break
:
while True:
username = input("username: ")
if username[0].isalpha():
break
print('username must start with a letter')
# do stuff