Похоже, что процесс, в котором работает пул приложений IIS, не имеет доступа на чтение к указанному вами каталогу.
Возможно, пул приложений IIS работает под учетной записью сетевой службы или ASP .NET 4.0 в зависимости от используемой версии .NET.
Попробуйте перейти к физическому каталогу и изменить свойства безопасности, чтобы предоставить Сетевой службе и ASP .NET 4.0 (если он существует на вашем компьютере) доступ для чтения.