Если есть только один выбранный элемент:
List<String> lstitems = new List<String>();
lstitems.Add(lstUsername.SelectedItem.Value);
Вот метод для получения нескольких выборов, поскольку System.Web.UI.WebControls.ListBox
не поддерживает SelectedItems:
// Retrieve the value, since that's usually what's important
var lstitems = lstUsername.GetSelectedIndices()
.Select(i => lstUsername.Items[i].Value)
.ToList();
Или без LINQ (есливы все еще на 2.0):
List<string> lstitems = new List<string():
foreach(int i in lstUsername.GetSelectedIndices())
{
lstitems.Add(lstUsername[i].Value);
}