Вы можете создать свой собственный ToolStripRenderer и переопределить OnRenderSeparator, чтобы нарисовать линию самостоятельно.
protected override void OnRenderSeparator(ToolStripSeparatorRenderEventArgs e)
{
using (var pen = new Pen(borderColor))
{
e.Graphics.DrawLine(pen, 5, e.Item.Size.Height / 2, e.Item.Size.Width - 5, e.Item.Size.Height / 2);
}
}
Затем вы устанавливаете свойство Renderer
вашей панели инструментов для только что созданного средства визуализации.
toolStrip.Renderer = new MyToolStripRenderer();